经典型霍奇金淋巴瘤(cHL)是儿童和青少年常见的恶性肿瘤。尽管cHL可高度治愈，但化疗和放疗通常以长期毒性为代价，需要有效的风险分层工具来进行个体化治疗。之前发表的成人cHL总生存期预测模型在儿童cHL中未进行验证。因此在本研究中，研究者使用基因表达谱(GEP)研究肿瘤微环境(TME)生物学，确定治疗失败的分子相关性，并开发儿科cHL的预后模型。GEP共入组儿童肿瘤组（COG）AHOD试验的患者例，用福尔马林固定、石蜡包埋组织活检，并与成人cHL数据进行了比较。该研究证明了儿童和青少年cHL独特的疾病生物学特征，并开发了基于基因表达的可用于诊断时风险分层的模型。
要点
反映肿瘤微环境组成的基因特征与COGAHOD试验中患者的无事件生存期（EFS）相关。
结局预后模型是根据5年EFS对患者进行风险分层。
研究背景
经典型霍奇金淋巴瘤(cHL)是儿童和青少年最常见的恶性肿瘤之一。由于治疗方法可能包括剂量密集型化疗，治愈率超过90%。然而，标准治疗的长期后遗症可能对总生存期(OS)产生负面影响，因此管理儿科cHL仍然面临着挑战。目前仍缺乏前瞻性验证的分子生物标志物，因此在儿童和青少年中开发此类生物标志物有助于平衡毒性与化疗、放疗和新型治疗的疗效。cHL表现出独特的形态学特征，因为恶性霍奇金细胞群和Reed-Sternberg(HRS)细胞的数量远远超过代表肿瘤微环境(TME)的免疫细胞和基质细胞。在成人cHL中进行的研究已经确定了TME中反应性免疫细胞的预后意义，尤其是巨噬细胞、T细胞亚群、B细胞和浆细胞。随着适用于福尔马林固定、石蜡包埋组织(FFPET)的技术平台的出现，已经开发了几种成人cHL的预后模型，利用多基因标签进行患者风险分层。然而，在儿科cHL患者中探索假定分子生物标志物的研究很少，主要限于单标志物免疫组织化学(IHC)研究。在此，我们报告了使用细胞组分评分开发的基于基因表达的模型，该模型在一项国际、多中心随机临床试验中识别了治疗失败高风险的儿童患者。
研究方法
为了生成儿科cHL无事件生存期(EFS)的预后模型，我们使用NanoStringCodeSets（包含已发表的cHL预后标志物和TME基因）对治疗前FFPET活检进行了基因表达谱分析(GEP)（表1）。对于模型构建和验证，我们从儿童肿瘤组(COG)中危HL试验AHOD中抽取构建队列(n=)和验证队列（n=71）。本试验将中度风险HL（约占所有儿科cHL患者的60%）定义为IB、IAE、IIB、IIAE、IIIA和IVA期伴或不伴巨大肿瘤，IA或IIA期伴巨大肿瘤。根据文献（表1），将基因分配至细胞组分特征，通过其组成基因的中位表达计算细胞组分评分。采用单变量Cox回归确定与EFS显著相关的细胞组分，进而输入建立EFS预后模型。使用胸腺和活化调节趋化因子(TARC)IHC验证GEP结果。
表1儿童HL验证队列的成对多变量分析
研究结果
在可用的份组织标本中，例病例(90%)产生了足够的GEP数据，通过了质量控制。我们将之前在成人中验证的23个基因模型应用于COGAHOD10儿童患者的构建队列中。根据该模型，51例儿科患者被归类为“高风险”，例被归类为“低风险”（图1A-C）。然而，该模型未能预测较差的结局，在高危组和低危组5年OS率分别为%vs.96.3%（P=.07）和5年EFS率分别为83.9%vs.70.6%（P=.09）（图1D-E）。该模型的6个基因CCL17、CXCL11、ALDH1A1、LMO2、IFNG和PRF1与EFS显著相关（P=.02,.,.01,.01，.,.）。但与成人队列相比，儿童队列的风险比相反。此外，使用Cox回归相互作用模型对比AHOD试验中的EFS与成人模型的EFS和OS，结果显示大多数基因特征具有显著不同的预后行为。TME组分评分与年龄的Spearman相关分析显示，年轻患者中嗜酸性粒细胞(P=3.7e-15)、B细胞(P=2.2e-07)和肥大细胞标记(P=1.3e-06)更显著，而老年患者中巨噬细胞(P=9.9e-16)和基质标记(P=2.2e-11)占主导地位。这些观察结果，结合成人和AHOD试验之间单个基因的相反风险比，强烈表明儿童和成人cHL的基础生物学存在差异。描述年龄分布和EBV的流行病学证据进一步支持了这一点。随后我们使用IHC验证我们的GEP数据。在构建队列中，67.4%的病例为TARC高。TARC高与低与病例的5年EFS存在显著差异（70.0%vs.86.6%，P=.），验证了基因表达结果。随后，我们测试了PHL-9C与其他临床参数的独立性。单因素Cox回归分析发现PHL-9C、发热与EFS在多变量Cox模型中也具有显著性，PHL-9C与发热和白蛋白无关。根据确定CHIPS16和早期应答状态的个体变量对PHL-9C进行成对多变量分析，发现PHL-9C与EFS相关，与IV期、发热、白蛋白和SER分层无关（表1）。
图1儿童cHL的细胞组分模型PHL-9C应用于独立验证队列
讨论
通过该研究，证明了反映TME生物学的GEP可预测大部分cHL儿童的治疗结果，并且基于基因表达的生物标志物PHL-9C在相应风险的治疗方案中能够可靠地识别治疗失败的高风险患者。鉴于其适用于常规可用的FFPET，PHL-9C可以在回顾性研究或生物标志物前瞻性研究中进一步测试。
参考文献RebeccaLJohnston,AnjaMottok,etal.Geneexpression-basedmodelpredictsout